1月10日，记者从南方医科大学实验动物中心了解到，该中心顾为望教授团队日前成功培育出世界首例白化西藏小型猪，同时敲除了与免疫相关的基因。

据了解，这项突破性成果不仅可以迅速实现实验用白化西藏小型猪的大规模繁殖，并且对于实验动物学、生物医药以及临床医学研究等领域都具有重大意义。

白化猪宝宝已诞生20多天发育良好

藏猪是我国独有的高原特殊品种，主要分布于我国青藏高原的农区和半农半牧区。藏猪体型小，抗逆性强，毛皮为黑色，2003年，被南方医科大学实验动物中心主任顾为望引进研究。

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，顾为望带领团队采用了“同步发情、人工授精、同步取卵、受精卵移植”的技术路线，对西藏小型猪进行基因改造。

顾为望介绍，这一方法是在小猪还是受精卵时，就对其敲除了白化相关基因及免疫相关基因，然后将改造后的受精卵移植到另一头“代孕”母猪体内。

2016年12月17日，“代孕”母猪生下了4个猪宝宝，其中两头小猪是纯白色，正好一雌一雄。出生20多天过去了，两只小白猪均发育良好。据了解，这是世界上获得的首例白化、同时敲除了免疫相关基因的实验用西藏小型猪。

“与转基因克隆猪相比，运用受精卵基因修饰获得的转基因猪，因为是通过自然的生殖过程诞生的，可以迅速实现大规模繁殖，批量生产供应实验研究用。”顾为望介绍。

经过改造后带免疫缺陷的实验猪，如果养在普通环境下很难存活。研究者们要把它养在无特定病原体环境下，所有的饲料、饮水、垫料全部经过严格消毒灭菌，24小时不间断空调，每小时全新风换气15次，室外空气需要经过初消、中消、高消三级过滤。

顾为望介绍，这样做是为了更好地控制实验用小型猪的质量，从而提高科研水平，提高科研结果的准确性、科学性、可重复性。

为何要培育白化小藏猪？

为什么小藏猪受到了顾为望的青睐？

他介绍，猪的消化系统、心血管系统、代谢过程等解剖结构以及生理功能和人类特别接近，是一种理想的实验动物。

家猪体型太大，做实验和药物研究都不太好操作，用药量太大，在新药研究的时候，实验室制备往往数量少，价格昂贵，不利于进行研究；而且长期观察需要几个月甚至一年，其要求饲养成本太高，饲养空间太大，动物质量难以控制。

而藏猪体型小，体质好，抗应激能力强，成本低，用药量少，便于操作和长期饲养观察。

为什么要把黑色的藏猪改造成白化猪？顾为望说，把藏猪做成白化品种，对于实验动物学有着十分重要的意义。

大多数常用实验动物如豚鼠、大鼠、小鼠、兔子，大多是白化品种品系，因为白色动物更加便于观察它的发热、过敏、炎症等症状以及皮肤角膜等损伤与修复的过程。

未来将培育白化+免疫缺陷小藏猪

顾为望介绍，接下来，研究团队将要把白化藏猪做成免疫缺陷猪。

一般情况下，人类肿瘤细胞在动物身上接种一般很难成活，但是有免疫缺陷的动物可以把人的肿瘤细胞原位或异位移植到体内，然后进行发病机理研究、临床疗效观察及药物开发。

因此，可以利用小型猪动物模型进行诊断、干细胞治疗和肿瘤防治，培育出有高血糖、先天性心脏病、辐照损伤等疾病的动物模型。

比如，可以用基因改造的办法把免疫缺陷猪的肝脏做成条件性损伤的肝脏，再把人的干细胞体外分化后注入猪体内，让猪的肝脏生长出人的肝细胞，用来治疗肝脏疾病。用猪生产的人源化干细胞做成的生物人工肝可以更有效地治疗肝衰，猪产生的人的肝细胞在新药研究开发中有广阔的市场前景。

他透露，其实，此次诞生的白化小藏猪，已经敲除了免疫相关基因，在基因型上也已检测到了免疫缺陷，但在外在表现上还需要进一步观察。

第二种研究方向是，可以把白化藏猪培育成无毛白化藏猪，用于化妆品的研究开发和应用，研究化妆品对皮肤的刺激性和抗皱、防衰老等功效，还可以用于皮肤用药的效果观察或皮肤用药研究。

此外，顾为望说，与其他学科领域专家不同的是，实验动物学专家更侧重培育可以在生命科学领域或是医学各个临床学科普遍推广应用的实验动物新品种品系，比如白化、无毛、免疫缺陷和微型猪等实验用猪。

【延伸阅读】

猪用作实验动物，已经有了哪些成果？

用猪可以生产出人用生物活性物质，如中科院广州生物医药与健康研究院赖良学团队通过基因编辑技术，使得用猪生产出的胰岛素和人的胰岛素一模一样；从猪血中可以提取凝血酶原及其激活物做成医用止血封闭剂；用猪可以生产出人的白蛋白。

在异种移植领域，猪是最有希望成为人的异种移植供体的动物。通过移植猪的胰岛细胞治疗人的糖尿病，已经进入临床实验阶段，目前在上千例接受猪的胰岛细胞移植的人身上还未发现有明显副作用。

另外，还可以用猪的神经干细胞治疗帕金森综合症、老年性痴呆，猪的神经干细胞移植被用于治疗帕金森病和阿尔茨海默病也已经在猴子、狒狒身上取得了明显疗效。

在组织移植、瓣膜、角膜和皮肤移植领域，医疗方面有广泛的实验，用猪的瓣膜修补人的心脏瓣膜缺损，已经在临床上大规模运用。角膜移植也已经进入临床实验研究阶段，通过移植猪的角膜，修补治疗病人的角膜缺损，可以使其视力恢复到0.4以上。

另外，猪的皮肤和人特别接近，把猪皮经过处理后作为良好的创口覆盖物，使人的受创皮肤自动愈合，用猪皮做基因工程皮肤已处在实验研究向临床过渡阶段。把猪皮脱去细胞，然后覆盖上人的皮肤干细胞，做成组织工程皮肤，可用于治疗大面积的烧伤、冻伤和化学品灼伤。

在器官移植领域，目前，有科学家将基因改造猪的心脏移植到狒狒体内，存活的时间达到945天。

在临床医师的技能培训和实验研究中，都广泛运用猪做实验动物如心脏导管支架实验、微创手术和介入治疗等。就临床而言，医院的骨科、耳鼻喉、眼科、皮肤、整形、心血管、糖尿病、内分泌、影像、微创介入、肝胆外科等众多科室研究中都会陆续运用到这些技术和方法。

【通讯员】黄瑶

【校对】曹柏英