圆环苗“技术为王”的2.0时代，普莱柯如何亮剑？

2017年11月19日，普莱柯猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗（大肠杆菌源）——“圆柯欣”上市发布会在广州召开。在“技术为王”的圆环苗市场竞争2.0时代，普莱柯圆柯欣以“国内第一个‘纯’病毒样颗粒”为宣传语，究竟有哪些亮点？

新牧网

11月20日，普莱柯总经理秦德超、国家兽用药品工程技术研究中心主任田克恭、新加坡国立大学生物科学系终身教授、圆柯欣共同合作开发者袁于人，做客新牧会客厅，探讨在群雄鏖战的圆环苗市场，普莱柯如何用科技创新引领圆环防控新潮流，如何实现帮养殖企业“解决问题”到“价值提升”。

访谈视频：

访谈主要内容：

1、目前市场上共计有33个厂家销售圆环苗，有行业人士认为普莱柯布局圆环亚单位疫苗及相关联苗，是为了市场的商业需求，请问普莱柯开发这些产品的初衷是什么？

秦德超：

满足客户的需求是企业发展生存发展的基本条件。普莱柯一直坚持“创新推动”，在中国生物制品行业里把创新做得最彻底、持续时间最长的企业。

普莱柯于7年前在国内首批上市圆环灭活疫苗（圆健），打破了进口疫苗对国内市场的垄断，就是为了帮助中国的养猪企业解决圆环问题。随着近年来平台的不断完善，普莱柯的技术能力已经从“解决问题”到达“创造价值”的阶段。

如果说初衷，主要在于如何给客户创造价值，从而实现企业自身的价值。

2、基因工程苗与全病毒疫苗在效果方面有本质区别吗？

田克恭：

从预防猪圆环病毒病来说，两者没有本质的区别。从产品的质量、品质和技术含量来说是完全不同的。新型圆环基因工程疫苗给免疫效果的提升、给生产成绩的提升、给客户带来的价值的提升是完全不同的。

3、据悉，普莱柯的圆柯欣是与袁于人教授合作开发，研发的技术难点在哪里？该产品做了哪些技术上的革新与突破？

袁于人：

疫苗好坏关键在于安全和有效。

圆柯欣的面世攻克了很多技术难点：例如提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性；确保表达蛋白能代表当前流行毒株的相关序列，以使得疫苗有较好的保护效果；提高表达蛋白的纯度，促使蛋白能合理组装成与圆环病毒构象一致的病毒样颗粒，从结构、功能、形态上都能最大限度地模仿全病毒的外壳，并且在温和的环境中不出现变性；确保所有生产过程能放大、可重复，适应于标准化、规模化生产。

而为了解决以上各种问题，圆柯欣在研发生产过程中细化了每一个步骤，并对相关平台进行改造，在很多方面都进行了升级。

4、普莱柯在产品研发和研发团队、平台建设方面的投入情况如何？

秦德超：

目前，普莱柯公司拥有两大创新平台：一是国家兽用药品工程技术研究中心，中心实验室面积12000多平米，配套实验动物中心9000多平米；以硕士博士为主体的研发团队近260人，近三年来研发投入都超过了总收入的8%。

二是与新加坡国立大学、中科院微生物研究所、军事医学科学院、中国农科院哈兽医研究所、中国动物疫病预防控制中心等国内外著名科研院所开展广泛的产学研合作。

5、在圆柯欣前期宣传推广中，强调了国内第一个“纯”病毒样颗粒的概念，如何解释这个“纯”字？

袁于人：

“纯”包含两个意思，一个是蛋白的纯。我们通过各种技术方面的提升，使得最终获得的蛋白达到95%以上的纯度。

第二个是病毒样颗粒的纯。圆柯欣不仅仅是一个蛋白产品，还需要把表达出来的蛋白组装成符合一定三维构象的病毒样颗粒。我们最后拿到的产品几乎是100%完成了病毒样颗粒的组装，且在冷冻电镜下看到的病毒样颗粒的大小几乎都是一样的，其表面抗原决定簇与真正病毒的表面结构几乎一样。也就是说，我们最后拿到的是几乎100%地组装成病毒样颗粒的产品。

6、从技术上分析，基因工程疫苗的技术壁垒并不高，而难度在于产品的纯化以及有效抗原的含量，普莱柯的圆柯欣如何保证有效抗原的同时将杂质降到最低？

袁于人：

对于一个好的基因工程疫苗，首先其目的蛋白的表达量要高，这是保证抗原含量的基础。此外，蛋白的纯度要高，其中涉及粗纯、精纯等步骤。

Cap蛋白经过表达、粗纯后，其中仍含有大量大肠杆菌的蛋白、核酸、细胞碎片等杂质，这些杂质会影响病毒样颗粒的形成，导致产生不完整和不规整的颗粒，同时也会影响疫苗的免疫效力。

此外，另一个关键问题是我们最终的产品是病毒样颗粒，因此那些没有组装成病毒样颗粒的单体蛋白也需要清除掉。

圆柯欣在生产过程中，每一步都有质量控制。通过多重蛋白层析纯化，获得了高纯度的Cap蛋白，将Cap蛋白的纯度提高至95%以上，从而为后续高效组装完整的病毒样颗粒奠定了基础。

7、从全病毒疫苗转换到基因工程苗有何风险？

田克恭：

没有任何问题，因为圆环亚单位基因工程疫苗安全性更好。

全病毒灭活苗除了有所需要的病毒之外，还有培养细胞、培养基血清等成分，其杂质相对比较多。

而圆柯欣这个基因工程疫苗通过四级纯化，有效Cap蛋白的含量达到95%以上，相对来说，疫苗里只有有用的蛋白，而少了无效成分，其安全性更高。

8、圆柯欣的免疫程序如何安排？

田克恭：

单纯的Cap蛋白可刺激机体发生体液免疫。而如果将Cap蛋白组装成了病毒样颗粒，则除了产生更高水平的体液免疫，还可产生细胞免疫。再加上圆柯欣专用水佐剂，使得其免疫保护周期更长。

1头猪于14日龄免疫1毫升，2-3周之后可产生坚强的免疫保护力，保护时间可维持6个月以上，确保商品猪1次免疫就能安全出栏。

9、目前普莱柯是同时拥有圆环基因工程苗与全病毒疫苗为数不多的厂家之一，这两个产品如何进行差异化销售？

秦德超：

这是一个下游用户如何选择的问题。

明年，普莱柯在圆环疫苗方面将有5个产品：圆环灭活苗、圆环水佐剂灭活苗、圆环-副猪水佐剂二联苗、圆环亚单位疫苗和圆环亚单位-支原体二联苗。

我们在原有基础上有了新一代产品，给客户提供了更多选择的机会。首先我们尊重客户的选择。另外，目前市场上存在两种类型，价格差异很大，有些产品买着贵，用着便宜。而未来我们还是要推荐大家逐渐过渡到亚单位疫苗的使用，无论是安全性还是有效性来说亚单位疫苗都更好。

10、疫苗的科学评价也是目前猪场所面临的难题，圆柯欣如何进行免疫效果评价？

田克恭：

圆环抗原在配苗前作为半成品而言，可以通过SDS-PAGE电泳、Western blot、双抗体夹心ELISA、胶体金试纸条及透射电镜这几种方法评估抗原的含量或纯度。

但当加入佐剂成为成品疫苗后结果就不一样了，因为佐剂作用的发挥离不开与抗原的充分结合，当佐剂把抗原包裹或吸附后，形成抗原/佐剂大颗粒，且抗原位点不能在短时间或一定的条件下充分暴露，就不可能通过免疫学方法或物理的方法进行抗原含量检测，即以上几种方法用于检测抗原含量就会具有各自的局限性，且不同的佐剂对检测结果影响也不一致。因此，临床在使用以上几种方法进行成品疫苗中抗原含量评估的时候一定不要太绝对。

采用抗体检测方法来评价疫苗的有效性相对来说较客观一些，可以使用圆环抗原抗体阴性猪或SPF小鼠进行圆环疫苗免疫后抗体评估，通过疫苗免疫后仔猪或小鼠抗体上升的高低水平及快慢程度进行分析。

猪圆环病毒病在临床上主要引起猪的免疫抑制和继发感染，判断该疫苗有效性的最有说服力的途径还是临床使用疫苗一段时间后，猪场的生产成绩能否得到一定程度的提升。

11、目前国内有无临床使用数据？

田克恭：

该产品在2014年9月16日获得农业部临床试验批件，随后在指定的4个猪场开展了临床试验，临床试验共免疫11274头猪。

其中安全性试验共免疫10730头仔猪，免疫后7日体温未见异常，无其他任何不良反应，且不影响仔猪生长；另外，安全性试验还免疫304头怀孕母猪，母猪免疫后精神、采食、饮水等均未见异常，在预产期内正常分娩，没有发生流产、早产等异常情况，并且与未免疫对照组相比，免疫母猪产仔数无明显差异。

免疫效力方面，截至猪只出栏，4个猪场免疫组的总体死淘率均低于对照组，平均日增重均显著高于对照组；免疫攻毒试验也表明，免疫组攻毒后可以达到完全保护的效果。

12、圆柯欣的终端定价是多少？

秦德超：

16元/头份。

圆柯欣的定价既不是按照成本定价，也不是根据竞争对手的价格来调整的，而是“价值定价法”。

所谓“价值定价法”，首先，是这个产品的技术程度能不能支持这个定价。通过7年的实验，圆柯欣凝聚的技术价值会在价格上有所体现。